圓二色光譜儀是一種分析化學(xué)中常用的儀器,主要用于測(cè)量物質(zhì)在不同波長下對(duì)于左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,從而得到有關(guān)于樣品結(jié)構(gòu)、構(gòu)象等信息。廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
圓二色光譜儀利用了圓二色現(xiàn)象,即分子或離子具有左旋性或右旋性時(shí),在經(jīng)過旋光片(一個(gè)將線偏振光轉(zhuǎn)化為圓偏振光的裝置)后就會(huì)對(duì)不同方向的圓偏振光產(chǎn)生不同的吸收,這種差異可以通過測(cè)量樣品在左旋圓偏振光和右旋圓偏振光下的吸收差異來進(jìn)行分析。
圓二色光譜儀通常采用兩個(gè)光源,一個(gè)是普通的白光源,另一個(gè)是偏振光源(通常是汞燈)。經(jīng)過旋光片后,兩個(gè)光源都會(huì)變成圓偏振光。這兩個(gè)光源的圓偏振光再經(jīng)過單色器或者光柵分光鏡,被分為不同波長的光,并通過樣品,最后被檢測(cè)器檢測(cè)到。在測(cè)量過程中,圓二色光譜儀可以同時(shí)檢測(cè)左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,并計(jì)算它們之間的差異,從而得到有關(guān)于樣品結(jié)構(gòu)、構(gòu)象等信息。
圓二色光譜儀主要由以下幾個(gè)部分組成:
光源:通常使用兩個(gè)光源,一個(gè)是白光源,另一個(gè)是汞燈。這兩個(gè)光源需要通過旋光片轉(zhuǎn)化為圓偏振光,在經(jīng)過單色器或者光柵分光鏡分離出不同波長的光線。
旋光片:用于將線偏振光轉(zhuǎn)化為圓偏振光。通常采用四分之一波片或半波片。
樣品池:用于放置樣品的儀器部件。通常使用四面透明的石英玻璃制作而成,以避免對(duì)于樣品的影響。
檢測(cè)器:可以檢測(cè)樣品在不同波長下對(duì)于左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,并計(jì)算它們之間的差異。
計(jì)算機(jī):用于控制儀器的測(cè)量參數(shù),收集和分析數(shù)據(jù)。通過計(jì)算機(jī)還可以進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、繪圖等操作。
圓二色光譜儀的優(yōu)勢(shì)包括:
1.可用于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)研究和定量分析。
2.測(cè)量簡便,操作方便,不需要標(biāo)記樣品。
3.可同時(shí)測(cè)量多個(gè)樣品或反應(yīng)體系的動(dòng)態(tài)變化。
4.適用于生物體系中不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)和核酸。
5.具有高選擇性和靈敏度,在微小的結(jié)構(gòu)改變時(shí)也能檢測(cè)到。